1.化学的試験法 (2)アンモニウム試験法

アンモニウム試験法は，医薬品中に混在するアンモニウム塩の限度試験である．これは体にとって有害なアンモニウム塩を規制するためだよ。
医薬品各条には，アンモニウム(NH4＋として)の限度をパーセント(％)で表示してある。
ちなみに昔はネスラー法が使われていたが、ネスラー試薬に含まれる塩化第2水銀が環境上良くないのでこれになった。

1. 装置
図1.02－1に示すアンモニウム試験用蒸留装置を用いる．ただし，減圧蒸留法（減圧して沸点下げる）を使う場合，図1.02－2の装置を用いる．

どちらも総硬質ガラス製であ，接続部はすり合わせにしてもよい．また，装置に用いるゴムは全て水酸化ナトリウム試液中で10 ～ 30分間煮沸し，次に水中で30 ～ 60分間煮沸し，最後に水でよく洗ってから使ってね．なんでこんなことするのか？そりゃあ酸とか混じってたらちゃんと測定できないでしょう？

2. 操作法

※（あらかじめ、水とアルカリ剤のみで規定の蒸留量まで加熱し、装置内のアンモニアを追い出した後、速やかに留液に相当する量の水を補い、試料を加えて再び加熱蒸留すると汚染による誤差を減らせる。）

2.1. 検液及び比較液の調製
医薬品の各条に書いてない限り，次の方法で検液と比較液を調製してね．
＜検液＞
蒸留フラスコAに、以下のものを順番に加える。
・医薬品各条に規定する量の試料
・水140 mL
・酸化マグネシウム2g

（アルカリ剤。もし水酸化ナトリウムを用いると、L-Trp,L-Thr,、塩酸リジンなどは脱アミノ化反応を起こすから。）

その後、蒸留装置(図1.02－1)を連結する．
そして、受器F (メスシリンダー)には
ホウ酸溶液(1→200) 20 mLを加える

（吸収液の役割り：アンモニウムを吸収するため：ホウ酸アンモニウム、硫酸も吸収できるがこのときは呈色反応時のpHを厳密に補正する必要がある）

そして冷却器の下端を吸収液に浸し，1分間5 ～ 7 mLの留出速度となるように加熱温度を調節し，留液60 mLを得るまで蒸留する．
冷却器の下端を液面から離し，少量の水でその部分を洗い込み，水を加えて100 mLとし，検液とする．

※もし、減圧蒸留法を適用する場合，
減圧蒸留フラスコLに以下のものを順番に加える
・医薬品各条に規定する量の試料
・水70 mL
・酸化マグネシウム 1g

その後、減圧蒸留装置(図1.02－2)を連結する．

そして受器M (フラスコ)には

・ホウ酸溶液(1→200) 20 mLを加える。

そして減圧蒸留フラスコの枝の先端を吸収液に浸し，水浴又はこれに代わる装置を用い60℃に保ち，1分間に1 ～ 2 mLの留出速度となるように減圧度を調整し，留液30 mLを得るまで減圧で蒸留する．

蒸留中は受器M (フラスコ)の球部を水で冷却する．枝の先端から液面を離し，少量の水でその部分を洗い込み，水を加えて100 mLとする．これを検液とし，試験を行う．

＜比較液＞
医薬品各条に書いてある量のアンモニウム標準液を蒸留フラスコAか減圧蒸留フラスコLにとり，以下のように操作する．

2.2. 検液及び比較液の試験
医薬品各条で書いてないなら次の方法による．
ネスラー管に、以下を加えて、混ぜる
・検液及び比較液30 mLずつ
・フェノール・ペンタシアノニトロシル鉄(Ⅲ)酸ナトリウム試液6.0 mL

（アンモニウム態窒素を吸光度から測定するために必要）

そして、次亜塩素酸ナトリウム・水酸化ナトリウム試液4 mL 及び水を加えて50 mLとし，混和した後，60分間放置する．

最後に、両管を白色の背景を用いて色の違いを見やすくして、上か横から観察して液の色を比較する．検液の色は，比較液の色より濃くない．